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摘要:為尋找防治草地貪夜蛾效果較好的植物資源,從20種植物中篩選出殺蟲效果較好的紫茉莉種子,評價紫茉莉種子中石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、水4種萃取物對草地貪夜蛾3齡幼蟲的室內殺蟲活性。采用小葉碟添加法進行拒食活性測定,24、48 h時紫茉莉種子石油醚萃取物對草地貪夜蛾3齡幼蟲的拒食中濃度(AFC50)分別為0.238、0.068 g/L;采用浸葉法進行胃毒活性試驗,1、3、5、7 d時紫茉莉種子石油醚萃取物的致死中濃度(LC50)分別為300.393、53.104、23.324、19.816 g/L;采用浸蟲法進行觸殺活性試驗,LC50分別為7.734、6.483、6.315、6.070 g/L。表明紫茉莉種子石油醚萃取物對草地貪夜蛾幼蟲具有較強的拒食、胃毒和觸殺活性,說明紫茉莉種子石油醚萃取物對草地貪夜蛾具有良好的殺蟲活性,有望為防治草地貪夜蛾新型天然殺蟲劑的開發提供依據。
關鍵詞:紫茉莉種子;草地貪夜蛾;拒食活性;胃毒活性;觸殺活性;生物防治
草地貪夜蛾(Spodoptera frugiperda J. E. Smith)是鱗翅目(Lepidoptera)夜蛾科(Noctuidae)灰翅夜蛾屬(Spodoptera)昆蟲,主要寄主為玉米,其次還有甘蔗、高粱、谷子、小麥、薏米、花生、莪術、香蕉、生姜、竹芋、水稻、馬鈴薯、油菜、辣椒等作物[1]。它具有啃食速度快、遷飛速度快、繁殖速度快和適應能力強等特點,嚴重威脅了重要經濟作物,阻礙了農業經濟的發展[2]。草地貪夜蛾起源于美洲的亞熱帶和熱帶地區,于2016年傳入非洲,經國際熱帶農業研究所鑒定為農業害蟲,給尼日利亞等非洲國家的農業經濟造成了極大損失[3]。2019年1月從緬甸傳入我國云南江城,隨后擴散至貴州、海南、廣西等多個省份,由于其暴發性強,難于防治,預測每年危害玉米、甘蔗等的面積約為 500萬hm2,給我國農業發展帶來了巨大挑戰[4]。聯合國糧農組織(FAO)通過對12個非洲國家評估發現,2018年草地貪夜蛾造成的玉米損失達1 770萬t,考慮到草地貪夜蛾對全球糧食和農民生計的威脅,FAO決定開展為期3年的全球草地貪夜蛾防控行動,旨在建立全球合作機制,以便隨時監測草地貪夜蛾的發展動向,遏制其向新地區入侵擴散[5]。目前有效控制草地貪夜蛾的主要手段是化學防治,化學防治易使其產生抗藥性,有數據顯示在草地貪夜蛾的防治過程中美洲多地區顯示出抗藥性,草地貪夜蛾至少對29種不同殺蟲化學成分產生了抗性[6-7]。除此之外蘇云金芽孢桿菌(Bt)轉基因作物也常用于草地貪夜蛾的防治,但隨著Bt作物種植面積的不斷增加,草地貪夜蛾對其也產生了抗性,致使表達Cry1Ab、Cry1F等毒素基因的許多Bt玉米在種植3年后即失去對草地貪夜蛾的防治作用,因此亟需找到新的防治途徑來控制草地貪夜蛾的擴散[8-9]。近年來,生物殺蟲劑成為研究熱點,生物殺蟲劑一般定義為從天然產物或自然界(包括動物、植物、微生物和礦物質)中提取的殺蟲劑,植物源殺蟲劑作為其中一種,具有較低的環境污染性和對哺乳動物的低毒害風險、對非目標生物的較高特異性和安全性、較低的耐藥性等特點,成為生物殺蟲劑創制的重要途徑和研究熱點[10]。
紫茉莉(Mirabilis jalapa L.)是紫茉莉科(Nyctaginaceae)紫茉莉屬(Mirabilis)草本植物,原產于熱帶美洲[11],果實為黑色瘦果,球形且表面具有皺紋,種子胚乳為細膩白粉質[12]。現在我國南北各地常作為觀賞花卉栽培,根、葉可供藥用,有清熱解毒、活血調經和滋補的功效[13]。紫茉莉種子白粉狀胚乳有延緩肌膚衰老、祛痘的作用,花的提取物可促進膠原蛋白合成,可用于制作化妝品[14-15]。彭躍峰等研究發現,紫茉莉莖的提取物對菜粉蝶幼蟲有拒食、胃毒以及毒殺活性,紫茉莉莖的三氯甲烷萃取物對菜粉蝶幼蟲殺蟲活性最強,且紫茉莉莖提取物有殺卵和抑制產卵的作用[16-17];曹曉莉研究比較了蒼耳子、艾蒿和紫茉莉3種植物葉和莖提取物的殺蚊效果,發現紫茉莉有較強的殺蚊活性[18];此外紫茉莉粗提物對二斑葉螨雌成螨和卵均有殺蟲和抑制發育活性[19];紫茉莉乙醇粗提物處理斜紋夜蛾,會削弱斜紋夜蛾的免疫活性,且紫茉莉所含的化合物可作為斜紋夜蛾的生物殺蟲劑和拒食劑[20-21],說明紫茉莉具有殺蟲作用,但目前還未發現紫茉莉提取物對草地貪夜蛾殺蟲活性的報道。本試驗前期測定了20種植物粗提物對草地貪夜蛾3齡幼蟲的室內殺蟲活性,發現紫茉莉種子粗提物的殺蟲活性較強,遂用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、水為溶劑將紫茉莉種子粗提物萃取成4個部分,并進一步研究紫茉莉對草地貪夜蛾的殺蟲活性。
1 材料與方法
1.1 供試材料
1.1.1 供試植物樣品 供試植物樣品于2021年4月購自云南省昆明市螺螄灣中藥材市場,經西南林業大學林學院植物學教研室杜凡教授鑒定為紫茉莉種子。將購買的樣品陰干粉碎,備用。
1.1.2 供試草地貪夜蛾 蟲卵由河南省濟源白云實業有限公司提供,在溫度為(25±1) ℃、相對濕度為(75±5)%、光—暗周期為16 h—8 h的人工氣候培養箱內培養,孵化出來的幼蟲用玉米葉片飼養,篩選生長發育狀態一致且健康的3齡初期幼蟲作為試蟲。
1.2 試驗方法與條件
1.2.1 植物提取物制備 紫茉莉種子陰干、粉碎,用95%乙醇溶液冷浸提取,減壓濃縮得到浸膏。將此粗提物懸浮在水中,依次用石油醚、三氯甲烷和乙酸乙酯萃取,得到石油醚萃取物、三氯甲烷萃取物、乙酸乙酯萃取物和水萃取物。
1.2.2 供試溶液配制 分別精確稱取一定量的萃取物于玻璃瓶中,用0.5%吐溫80水溶液配成不同濃度。用0.5%吐溫80水溶液作陰性對照,用除蟲菊酯和印楝素分別作陽性對照。
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