[摘 要] 革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法，1884年由丹麥醫師、細菌學家漢斯·克里斯蒂安·約阿希姆·革蘭氏(Hans Christian Joachim Gram,1853-1938)創立。文章發表在《世界臨床醫學》上，是醫學核心期刊投稿論文發表范文，供同行參考。
[關鍵詞] 革蘭染色法;懸浮法;陰道分泌物
細菌先經堿性染料結晶紫染色，而經碘液媒染后，用酒精脫色，在一定條件下有的細菌紫色不被脫去，有的可被脫去，因此可把細菌分為兩大類，前者叫做革蘭氏陽性菌(G+)，后者為革蘭氏陰性菌(G—)。為觀察方便，脫色后再用一種紅色染料如堿性蕃紅、稀釋復紅等進行復染。陽性菌仍帶紫色，陰性菌則被染上紅色。有芽胞的桿菌和絕大多數的球菌，以及所有的放線菌和真菌都呈革蘭氏正反應;弧菌，螺旋體和大多數致病性的無芽胞桿菌都呈現負反應。
目的：對比革蘭染色法和懸浮法對陰道分泌物的檢出率，提高陰道分泌物的陽性檢出率。方法：對480例婦科門診患者陰道分泌物同時采用懸浮法和革蘭染色法進行檢測。結果：懸浮法霉菌檢出率為17.3%,滴蟲檢出率為6.25%;革蘭染色法霉菌檢出率為22.7%,滴蟲檢出率為8.54%,淋球菌檢出率為1.04%,線索細胞檢出率為12.7%。結論:建議將革蘭染色法作為婦科陰道分泌物常規檢查項目,特別是高度懷疑的標本,更應用革蘭染色法進行檢測,以提高臨床診治水平。
目前，陰道宮頸炎為婦女的一種常見病、多發病，直接影響婦女的日常工作和生活。國內多采用懸浮法檢查陰道分泌物，漏診率高、檢出率低，且不利于建立質控[1]。本文對婦科門診480例患者陰道分泌物用革蘭染色法和懸浮法同時進行檢測，現報告如下。
1 資料與方法
1.1 標本來源 2004年5月至2005年12月期間，收集本院婦科門診患者陰道分泌物480例，年齡17歲～62歲，平均年齡30歲。
1.2 儀器與試劑 日本OLYMPUS光學顯微鏡;革蘭染液由四川邁克科技有限責任公司提供。
1.3 方法 留取標本后30 min內保溫送檢，由專人用懸浮法制成1.5 cm～2.0 cm、3.5 cm～4.0 cm的涂片檢查，待干后進行革蘭染色(操作按說明書進行)并作好標記，顯微鏡下先用低倍鏡粗掃有無梨形、圓形、橢圓形或不規則形疑似滴蟲，換油鏡仔細辨認具有整個胞體紅似粒細胞核及鞭毛等特征為滴蟲，同時在油鏡下檢查霉菌、淋球菌、線索細胞等。
2 結果
480例標本檢查結果：懸浮法霉菌檢出率為17.3%(83例),滴蟲檢出率為6.25%(30例);革蘭染色法霉菌檢出率為22.7%(109例)，滴蟲檢出率為8.54%(41例)，淋球菌檢出率為1.04%(5例)，線索細胞檢出率為12.7%(61例)，懸浮法和染色法對滴蟲的檢出率比較差異無顯著性,P>0.05,但染色法檢出率高于懸浮法。懸浮法和染色法對霉菌的檢出率經卡方檢驗P<0.05,有顯著意義,染色法對霉菌的檢出率明顯高于懸浮法。另外染色法陽性而懸浮法陰性霉菌26例，滴蟲11例，懸浮法陽性而染色法陰性霉菌2例，滴蟲2例，復查均為陽性，淋球菌混合滴蟲感染1例。
3 討論
霉菌、滴蟲及細菌性陰道宮頸炎是婦科常見病、多發病，且患者陰道分泌物性狀和臨床表現常無明顯區別[2]，而陰道分泌物涂片檢查是婦科常規檢查項目，能直接反映陰道及宮頸是否存在炎癥及感染程度。陰道分泌物檢測方法的改進及準確的結果判斷為臨床提供重要診斷依據，使臨床醫生作到了對癥下藥，避免濫用抗生素，對婦科病的防治具有良好的社會效益和經濟效益[3]，同時使夫妻間的性生活因婦科疾病影響女方性欲得到改善。從本文兩種檢查方法所得結果來看，革蘭染色法檢出率高于懸浮法，霉菌的檢出率差異有顯著性。據張妮[4]報道，滴蟲可能因寒冷季節受溫度影響或標本不能即時送檢使活動力減低及清潔度差難與白細胞區別，造成懸浮法識別困難;霉菌可因上皮細胞透明度差而使得懸浮法辨認受影響。另外革蘭染色法檢出淋球菌混合滴蟲感染1例，若用懸浮法，則很可能因鏡下白細胞的移動檢出滴蟲，而忽視白細胞內外革蘭陰性雙球菌的檢測，又因女性淋球菌感染臨床表現不特異或無癥狀[5]，臨床醫生易根據檢驗單結果診斷為單純的滴蟲感染，這樣會給患者造成久治不愈甚至流產、早產[5]等嚴重后果。懸浮法陽性而染色法陰性霉菌2例，滴蟲2例，復查均為陽性，這可能與初期檢驗人員的識別能力有關。綜上所述，革蘭染色法有以下優點：一份標本可多項目檢查，特別是淋球菌、加德納菌和其他條件致病菌的檢測是懸浮法所不能及的;設備和技術條件要求不高，成本低，易普及;查滴蟲時不受季節溫度的影響;標本染色后病原體基本被殺滅，降低了環境污染;染色標本可較長時間保存以便復查及作為質量監督，另外可挑選染色好病原體典型的標本作為教學片及送各家醫院臨檢室進行交流，提高對滴蟲、霉菌、淋球菌及線索細胞等識別有困難的檢驗者的水平。
在治療上，大多數革蘭氏陽性菌都對青霉素敏感(結核桿菌對青霉素不敏感);而革蘭氏陰性菌則對青霉素不敏感(但奈瑟氏菌中的流行性腦膜炎雙球菌和淋病雙球菌對青霉素敏感)，而對鏈霉素、氯霉素等敏感。所以首先區分病原菌是革蘭氏陽性菌還是陰性菌，在選擇抗生素方面意義重大。
醫學核心期刊投稿發表須知：《世界臨床醫學》雜志是由中國國家新聞出版總署和國家科技部批準在海內外公開發行的傳統醫藥行業發展與學術研究綜合性月刊(國內統一刊號：CN11-5576國際統一刊號：ISSN1009-3389)。
參考文獻：
[1] 鄧光貴.用吖啶橙染色法快速檢查陰道分泌物涂片[J].中華醫學檢驗雜志，1992，15(4)：225.
[2] 李曼輝，宋芳，王輝.陰道分泌物快速染色法與懸滴法比較及質控[J].中國現代醫藥雜志，2005，7(1)：13.
[3] 黃共產，翁寶川，馬標興.12096例婦科陰道分泌物白帶常規染色鏡檢結果分析[J].中國實驗診斷學，2005，9(5)：815816.
[4] 張妮.206例陰道分泌物生理鹽水直接涂片法和染色法的結果比較分析[J].實用醫技雜志.2005，12(5)：1119.
[5] 邵長庚，趙辨.臨床皮膚病學[M].江蘇科學技術出版社，529.
