摘要 金線蓮為名貴中藥材，野生資源稀缺，林下仿野生栽培是滿足人們對(duì)金線蓮數(shù)量和品質(zhì)需求的較好途徑。本文利用林下仿野生栽培的金線蓮，對(duì)不同月齡干燥全草有效成分含量進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，6月齡和8月齡干燥全草總黃酮(以蘆丁計(jì))含量分別為9.226 mg/g和9.627 mg/g，后者較前者提高4.35%;多糖(以無(wú)水葡萄糖計(jì))含量分別為191.702 mg/g和125.249 mg/g，后者較前者下降34.66%;多酚(以沒(méi)食子酸計(jì))含量分別為8.006 mg/g和8.641 mg/g，后期較前者提高7.93%。初步表明，林下仿野生栽培金線蓮全株總黃酮和多酚含量隨月齡延長(zhǎng)而提高、多糖含量隨月齡延長(zhǎng)而下降。這一結(jié)果可為金線蓮的臨床應(yīng)用提供一定的參考。

　　關(guān)鍵詞 金線蓮;林下仿野生栽培;月齡;總黃酮;多糖;多酚

　　金線蓮(Anoectochilus roxburghii)是一種名貴稀有中藥材，素有“南方冬蟲(chóng)夏草”“藥王”等美譽(yù)，以全草入藥，具有清熱、涼血、解毒、祛風(fēng)除濕等功效[1]。金線蓮喜陰涼潮濕，適宜生長(zhǎng)溫度為20～32 ℃，適宜光照約為正常日照的1/3，生長(zhǎng)條件比較苛刻，所以人工栽培一般對(duì)設(shè)施要求嚴(yán)苛，生產(chǎn)成本高，且有效成分含量不如野生金線蓮。利用高山林下陰涼濕潤(rùn)、避光的自然環(huán)境和山林中的自然蓄水條件，以林下腐殖質(zhì)作為培養(yǎng)基質(zhì)，可實(shí)現(xiàn)林下仿野生栽培。有研究表明，林下仿野生種植的金線蓮體外抗氧化活性與野生型金線蓮無(wú)顯著差異[2]。林下栽培多處于高山密林中，自然生態(tài)條件優(yōu)異，其安全品質(zhì)較人工設(shè)施栽培更好。林下仿野生栽培金線蓮，既滿足了人們對(duì)金線蓮稀有藥材數(shù)量和品質(zhì)的需求，又增加了種植業(yè)收入，是發(fā)展林下經(jīng)濟(jì)的一種有益模式。本研究對(duì)林下仿野生栽培的金線蓮不同月齡干燥全草中總黃酮、多糖、多酚3個(gè)重要有效成分指標(biāo)進(jìn)行了比較分析。

　　1 材料與方法

　　1.1 試驗(yàn)材料

　　試驗(yàn)材料為林下仿野生栽培的6月齡金線蓮和8月齡金線蓮干燥全草。林下仿野生栽培地點(diǎn)位于浙江省建德市三都鎮(zhèn)羊峨村尖竹山，該山平均海拔810 m，基地位于該山海拔700～720 m的北麓，平均坡度42°，樹(shù)木類(lèi)型以水杉、毛竹為主，夏季平均遮光度66%～73%，生長(zhǎng)期每月溫濕度如表1所示。水源為基地上游約50 m處收集的山泉，pH值7.87。利用林下落葉腐殖物和風(fēng)化土順坡做畦，畦面高12 cm、寬80 cm，土壤pH值4.60。6月齡金線蓮于2018年5月10日定植，8月齡金線蓮于2018年3月10日定植，行株距為10 cm×10 cm。金線蓮種苗由金華市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院通過(guò)組織培養(yǎng)培育，苗齡3～4葉。2018年11月5日分別隨機(jī)收取金線蓮全草、低溫烘干，分別稱(chēng)取200 g干樣本用于檢測(cè)。

　　1.2 儀器與試劑

　　試驗(yàn)所用主要儀器：UV2450紫外分光光度計(jì)，由島津公司生產(chǎn);R-201旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，由上海申順生物科技有限公司生產(chǎn);DK-S26型電熱恒溫水浴鍋，由上海森信試驗(yàn)儀器有限公司生產(chǎn);KQ-250B超聲波洗滌機(jī)，由昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)。

　　主要試劑：沒(méi)食子酸、蘆丁標(biāo)準(zhǔn)樣品，由Aladdin公司生產(chǎn);福林酚試劑，由Wolsen公司生產(chǎn);其他試劑均為分析純級(jí)。

　　1.3 試驗(yàn)方法

　　總黃酮含量(以蘆丁計(jì))用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH法測(cè)定[3];多糖含量(以無(wú)水葡萄糖計(jì))用苯酚-硫酸法測(cè)定[4]，多酚含量(以沒(méi)食子酸計(jì))用Folin-Ciocalteu法測(cè)定[5]。檢測(cè)工作在浙江省現(xiàn)代森林培育技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，試驗(yàn)溫度25 ℃，濕度30%～50%。

　　2 結(jié)果與分析

　　2.1 不同月齡金線蓮總黃酮含量

　　從圖1可以看出，林下仿野生栽培金線蓮6月齡干燥全草總黃酮含量為9.226 mg/g，8月齡干燥全草總黃酮含量達(dá)到9.627 mg/g，較6月齡提高了4.35%。表明隨著月齡延長(zhǎng)，金線蓮全草總黃酮含量增加。這可能是由于隨著月齡延長(zhǎng)，次生代謝物質(zhì)積累增多。

　　2.2 不同月齡金線蓮多糖含量

　　林下仿野生栽培金線蓮6月齡和8月齡干燥全草多糖含量分別為191.702 mg/g和125.249 mg/g(圖2)，8月齡干燥全草多糖含量較6月齡下降了34.66%。表明隨著月齡延長(zhǎng)，多糖含量下降幅度較大。造成這種變化趨勢(shì)的原因可能是，作為初級(jí)代謝物的多糖在金線蓮生長(zhǎng)過(guò)程中參與其他物質(zhì)的代謝，部分多糖被轉(zhuǎn)化為黃酮、多酚等其他次生代謝物質(zhì)。

　　2.3 不同月齡金線蓮多酚含量

　　從圖3可以看出，林下仿野生栽培金線蓮干燥全草多酚含量隨月齡延長(zhǎng)而增多，6月齡全草多酚含量為8.006 mg/g，到8月齡時(shí)增加至8.641 mg/g，提高幅度達(dá)到7.93%。多酚含量的增長(zhǎng)趨勢(shì)可能也與多糖代謝和次生代謝物質(zhì)積累增多有關(guān)。

　　3 結(jié)論與討論

　　總黃酮、多糖、多酚等有效成分含量是金線蓮營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值的重要指標(biāo)[6-7]。一般認(rèn)為，人工栽培金線蓮與野生型金線蓮相比，有效成分含量較低。本研究中在海拔為700～720 m的建德市高山地區(qū)林下仿野生栽培金線蓮，結(jié)果表明，6月齡至8月齡干燥全草有效成分總黃酮含量為9.226～9.627 mg/g、多糖含量為125.249～191.702 mg/g、多酚含量8.006～8.641 mg/g，與野生金線蓮有效成分含量(總黃酮5.337～7.090 mg/g，多糖67.0～191.8 mg/g[8])相當(dāng)或較優(yōu)，優(yōu)于基質(zhì)栽培有效成分含量(總黃酮5.9～8.9 mg/g，多糖61.8～78.9 mg/g，多酚5.2～7.3 mg/g[9])，表明在高山區(qū)林下仿野生栽培的金線蓮營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值較高。研究還初步認(rèn)為，隨著月齡延長(zhǎng)，初生代謝物多糖的含量有下降趨勢(shì)，次生代謝物總黃酮、多酚的含量有上升趨勢(shì)，這一結(jié)論可為不同臨床目的應(yīng)用金線蓮的月齡標(biāo)準(zhǔn)提供一定的參考。

　　4 參考文獻(xiàn)

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　　作者： 孫加焱

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